試管中精液的優(yōu)化處理
游海 2022-8-22 10:03 試管之家 查看: 307 評論: 0
摘要: 1、為什么需要優(yōu)化處理? 研究表明,人類精子的畸形率高于其他親源物種,即使正常可育精子也包含數(shù)百萬不活動精子和一定比例的畸形精子。不活動精子、畸形精子非但于受精無益,還會污染培養(yǎng)系統(tǒng),影響體外受精成 ...
1、為什么需要優(yōu)化處理? 研究表明,人類精子的畸形率高于其他親源物種,即使正??捎右舶瑪?shù)百萬不活動精子和一定比例的畸形精子。不活動精子、畸形精子非但于受精無益,還會污染培養(yǎng)系統(tǒng),影響體外受精成功率。 體外受精要求精液精子形態(tài)正常,運(yùn)動能力尤其是向前運(yùn)動能力強(qiáng),并達(dá)到一定密度。由于精漿中含有抑制精子獲能和受精的物質(zhì),因此在體外受精前,必須處理精液,去除精漿,去除細(xì)菌及可能存在的炎癥細(xì)胞、抗精子抗體等,分離并富集正?;顒泳?提高精子活動率。 2、有哪些方法? 實(shí)驗(yàn)室常使用密度梯度離心法、上游法和直接離心法三種方式分離正常的精子。 上游法是將精液加在上游試劑上方共同孵育,使活力好的精子游到上層培養(yǎng)液中。該方法可回收質(zhì)量較高的精子,優(yōu)點(diǎn)是不良反應(yīng)少,可獲得更低DNA碎片率的精子;缺點(diǎn)是回收率相對較低。所以該方法適合活動力好,前向運(yùn)動精子總數(shù)多的精液標(biāo)本,不適合前向運(yùn)動精子總數(shù)少、粘稠或不液化的精液標(biāo)本。密度梯度離心法是將精液和兩種濃度高低不同的梯度分離液從上到下依次分層加入,由于正常精子與畸形精子、不活動精子及精液中其他細(xì)胞成分在運(yùn)動能力、運(yùn)動軌跡和浮力密度等方面存在差異,在密度梯度溶液中運(yùn)行的能力也有差異,經(jīng)離心后得到富集。該方法適用于質(zhì)量較差、前向運(yùn)動精子總數(shù)較少的精液標(biāo)本。直接離心法是指將精液與培養(yǎng)液混合后直接離心,將沉淀洗滌后定容于培養(yǎng)液。該方法不能很好的去除精液中的雜質(zhì),故適用于精子數(shù)少極其珍貴的標(biāo)本,如睪丸穿刺取精和附睪穿刺取精,一些冷凍精液,逆行射精等。 |