做試管嬰兒時，最怕的就是精*不結(jié)合，即使常規(guī)檢查精子數(shù)量和形態(tài)都是“正常”的，有時也會發(fā)生受精失敗，且很多是不明原因。近年來，人類精子遺傳缺陷在影響受精方面的研究越來越多。

　　受精是指*子和精子融合為一個合子，是試管嬰兒助孕的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。但是，偶然會遇到受精失敗，成為醫(yī)生和不孕夫婦的心頭刺。大部分的受精失敗可以通過單精子*胞漿注射（ICSI）技術(shù)，俗稱二*試管嬰兒助孕彌補。但仍然有1%～3%的病例，即便采用第二*技術(shù)，仍然發(fā)生全部*母細(xì)胞不受精，導(dǎo)致試管嬰兒顆粒無收。通常受精失敗大多數(shù)是精子因素，目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)不少單基因變異導(dǎo)致的精子遺傳缺陷。

　　ICSI技術(shù)主要適用于男性不育，如嚴(yán)重少弱精子癥，或能從附睪或睪丸中提取到精子的無精子癥，以及第一*試管嬰兒技術(shù)（IVF）不受精或受精率低下等。胚胎師通過挑選活力與形態(tài)比較好的精子，通過顯微注射技術(shù)將精子注入*母細(xì)胞內(nèi)，實現(xiàn)受精過程。通常在注射精子后16-18小時觀察*母細(xì)胞，若形成雙原核（雄原核和雌原核），且出現(xiàn)雙極體（第一極體和第二極體）則判斷為正常受精；若觀察到三原核（或多原核）和單原核判斷為異常受精；而沒有形成原核則判斷為受精失敗。

　　精子被注射進(jìn)入*母細(xì)胞并不*表一定可以受精，還需要激活*母細(xì)胞才能完成正常受精。打個比方：精子好比鑰匙，*母細(xì)胞就像一把鎖；鑰匙插入鎖孔后，必須要進(jìn)行旋轉(zhuǎn)才能打開鎖。這個“旋轉(zhuǎn)”動作就類似*母細(xì)胞激活。現(xiàn)在已經(jīng)闡明，精子是通過一個關(guān)鍵因子特異性磷脂酶C(PLCζ)激活*母細(xì)胞，才能完成受精，打開*母細(xì)胞這把精細(xì)的鎖。

　　作為人體非常重要的信號分子，PLCζ主要分布在精子頂體和核之間的核周鞘內(nèi)。在精子被注射進(jìn)入*細(xì)胞并發(fā)生頂體反應(yīng)后，核周鞘暴露在*胞漿內(nèi)，溶解釋放PLCζ，觸發(fā)*的鈣離子震蕩，進(jìn)而啟動*母細(xì)胞激活完成受精。PLCζ表達(dá)和功能異常，是多種遺傳缺陷引起受精障礙的共同關(guān)鍵步驟。

　　目前確定導(dǎo)致受精失敗的精子遺傳缺陷主要有：（1）PLCZ1基因變異，直接導(dǎo)致PLCζ表達(dá)缺失。國內(nèi)外多篇文章報道PLCZ1基因變異導(dǎo)致精子PLCζ缺失，從而導(dǎo)致*母細(xì)胞不能激活和受精失??；（2）PICK1、SPACA1、SPATA16和DPY19L2等基因變異，導(dǎo)致經(jīng)典的圓頭精子癥，精子的頂體與核周鞘均缺失。（3）ACTL7A和ACTL9基因變異，它們是核周鞘結(jié)構(gòu)蛋白，基因變異導(dǎo)致精子頂體和核周鞘超微結(jié)構(gòu)異常，從而影響PLCζ的定位并伴有表達(dá)量下降。國內(nèi)學(xué)者近兩年報道了ACTL7A和ACTL9基因變異導(dǎo)致的多個受精失敗臨床病例。以上這些遺傳缺陷都會導(dǎo)致PLCζ缺失、表達(dá)異常、以及活性降低，結(jié)果是受精失敗。

　　*母細(xì)胞輔助激活（AOA）是人工模擬精子激活*母細(xì)胞的過程，是目前公認(rèn)的治療ICSI受精失敗的有效手段。AOA的方法主要分為物理激活（電激活）和化學(xué)激活兩大類。

　?。?）物理激活（電激活）的原理是給*母細(xì)胞在短暫直流電壓，在*質(zhì)膜上形成很多可恢復(fù)的微小孔，胞外鈣離子可通過微小孔進(jìn)入*胞質(zhì)中，人為形成鈣離子震蕩激活*母細(xì)胞。電激活由于需要特殊的電激活設(shè)備，同時安全性不能保證，目前國內(nèi)臨床應(yīng)用較少。

　?。?）化學(xué)激活是將完成ICSI注射的*母細(xì)胞放入一定濃度的激活劑（如鈣離子載體A23187、離子霉素ionomycin和氯化鍶SrCl2等）中，使*母細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平升高，人為造成鈣離子震蕩，應(yīng)用最為普遍。

　　目前認(rèn)為AOA對胚胎發(fā)育和子*安全均無顯著影響，但由于還缺乏大規(guī)模、前瞻性臨床試驗來證實其安全性。我們在臨床應(yīng)用的過程中需要嚴(yán)格把握其指征，避免擴(kuò)大其應(yīng)用范圍。

　　對于第二*試管嬰兒受精失敗的病例，臨床上通過對精子進(jìn)行光鏡下精子形態(tài)學(xué)檢測（鑒別圓頭精子癥），透射電鏡下觀察精子超微結(jié)構(gòu)（明確核周鞘超微結(jié)構(gòu)是否異常），精子免疫熒光和精子蛋白印跡（證明PLCζ是否缺失、表達(dá)異常）等技術(shù)手段，以及遺傳學(xué)基因檢測（篩查PLCZ1、ACTL7A、ACTL9等基因變異），可以幫助明確50%左右受精失敗的原因。精子PLCζ相關(guān)檢測可以作為受精失敗以及不明原因不育癥的重要檢測方法之一，并可以通過*子激活技術(shù)嘗試幫助ICSI受精。