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如何“喚醒”冷凍胚胎？

發(fā)表于2021-06-21 18:00:18 48 0
胚胎的解凍與冷凍相反，是將胚胎從超低溫狀態(tài)下恢復(fù)至正常生理狀態(tài)的過(guò)程。
解凍主要有兩個(gè)過(guò)程，一個(gè)是復(fù)溫，一個(gè)是去除冷凍保護(hù)劑，最終達(dá)到恢復(fù)胚胎生理活性及繼續(xù)發(fā)育的目的。復(fù)溫一般采用較快的升溫速度，避免在中間產(chǎn)生一些冰晶對(duì)胚胎造成損傷，胚胎冷凍時(shí)，胚胎中滲透了高濃度的冷凍保護(hù)劑，復(fù)溫后需及時(shí)將其去除，使水分能替*保護(hù)劑滲入細(xì)胞內(nèi)，因此解凍劑中含有一些非滲透性保護(hù)劑，胚胎可逐步吸收水分，并將冷凍劑從胚胎細(xì)胞中滲出，且不會(huì)因水分吸收過(guò)快而導(dǎo)致細(xì)胞膜內(nèi)外滲透壓劇烈變化，對(duì)胚胎造成損傷。

胚胎解凍時(shí)選擇何種方法需依據(jù)胚胎冷凍時(shí)選擇的方法，不同的冷凍方法不僅冷凍原理有差別，且胚胎裝載的方式也完全不同，因此解凍時(shí)也需采用不同的解凍方法和程序，如胚胎冷凍常用兩種方法，一種是程序冷凍法，一種是玻璃化冷凍法。在程序冷凍法中，胚胎是裝載在充滿冷凍液的冷凍管中，降溫過(guò)程也是按照一定的速率較緩慢的降到一個(gè)穩(wěn)定的溫度，約在-35℃到-80℃之間，再投入液氮，整個(gè)過(guò)程大概需兩個(gè)小時(shí)，解凍時(shí)也需用程序的解凍法，復(fù)溫的速度雖要求較快，但為避免體積和溫度急劇變化導(dǎo)致胚胎受損，則需將冷凍管從液氮取出后，先在空氣中停留一段時(shí)間，然后再升溫到37℃，而玻璃化冷凍時(shí)，胚胎是在高濃度的冷凍保護(hù)劑中進(jìn)行短時(shí)間平衡后，使用極少量的保護(hù)劑，再將它們裝載在導(dǎo)熱性較好的載體上，直接被投入液氮中，胚胎瞬間被冷凍，從生理溫度降至-196℃，整個(gè)冷凍過(guò)程僅7-8分鐘，玻璃化解凍時(shí)復(fù)蘇溫度也極快，胚胎從液氮中取出后，立即從-196℃直接升溫至生理溫度。
總之，解凍方法需與冷凍時(shí)的方法相對(duì)應(yīng)，這樣更有利于胚胎的復(fù)蘇及生理功能的恢復(fù)，不恰當(dāng)?shù)膹?fù)蘇方法會(huì)對(duì)胚胎造成較大的損傷。
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